GMO பயிர் பிரித்தெடுத்தல் & பெருக்கம் கிட்

GMO பயிர் பிரித்தெடுத்தல் மற்றும் டிரான்ஸ்ஜெனிக் PCR கண்டறிதலுக்கு குறிப்பாக பொருத்தமானது.

GMO பயிர் பிரித்தெடுத்தல் மற்றும் பெருக்கம் கிட் குறிப்பாக GMO பயிர்களை PCR கண்டறிவதற்காக உருவாக்கப்பட்டது. கிட் பாகம் A இல் உள்ள தனித்துவமான லைசிஸ் பஃபர் குறிப்பாக முக்கிய பயிர்களின் திசுக்களை ——— கோதுமை, சோளம், அரிசி, பருத்தி மற்றும் சோயாபீன்ஸ், நியூக்ளிக் அமிலங்கள் மற்றும் புரதங்கள் போன்ற தொடர்புடைய கூறுகளை வெளியிட உதவுகிறது. குறிப்பிட்ட RNase உடன் இணைந்து பினோல்/குளோரோஃபார்ம் பிரித்தெடுத்தல் RNA, புரதம் மற்றும் உலோக அயனிகள் போன்ற அசுத்தங்கள் இல்லாமல் அதிக தூய்மை மரபணு டிஎன்ஏவை சுத்தப்படுத்த முடியும். சுத்திகரிக்கப்பட்ட டிஎன்ஏ அடுத்தடுத்த பிசிஆர் கண்டறிதலில் பயன்படுத்தப்படலாம். கிட்டின் பகுதி B என்பது 2-GMO PCR இடையகம் மற்றும் GMO DNA பாலிமரேஸ் கொண்ட இரண்டு-கூறு எளிய PCR எதிர்வினை அமைப்பு ஆகும். GMO DNA பாலிமரேஸ் என்பது ஆன்டிபாடிகளுடன் மாற்றியமைக்கப்பட்ட தெர்மோஸ்டபிள் பாலிமரேஸ் ஆகும். 2 × GMO PCR இடையகத்தில் MgCl போன்ற பல்வேறு கூறுகள் உள்ளன₂, dNTP கள், PCR எதிர்வினை நிலைப்படுத்தி, உகப்பாக்கி மற்றும் 2 × GMO செறிவில் மேம்படுத்துபவர். இது வேகமான மற்றும் எளிமையான செயல்பாடு, அதிக உணர்திறன், வலுவான குறிப்பிட்ட தன்மை, நல்ல நிலைத்தன்மை போன்றவற்றின் நன்மைகளை கொண்டுள்ளது.

பூனை இல்லை	பேக்கிங் அளவு
4992905	200 ஆர்எக்ஸ்என்

எங்களுக்கு மின்னஞ்சல் அனுப்பவும்

தயாரிப்பு விவரம்

சோதனை உதாரணம்

அடிக்கடி கேட்கப்படும் கேள்விகள்

தயாரிப்பு குறிச்சொற்கள்

அம்சங்கள்

Applic பரவலான பொருந்தக்கூடிய தன்மை: இந்த கிட் ஐந்து முக்கிய GMO பயிர்களில் இருந்து உயர்தர மரபணு டிஎன்ஏவை பிரித்தெடுக்க முடியும்.
And எளிய மற்றும் வேகமான: GMO பயிர் மரபணு டிஎன்ஏ பிரித்தெடுத்தலை 2 மணி நேரத்திற்குள் முடிக்க முடியும். பெரிய குளிரூட்டப்பட்ட மையவிலக்குகள் தேவையில்லை, கருவிகள் மற்றும் உபகரணங்களுக்கான குறைந்த தேவைகள். ஆராய்ச்சி நிறுவனங்களின் அனைத்து நிலைகளிலும் GMO பயிர்களின் விரைவான மரபணு டிஎன்ஏ பிரித்தெடுத்தலுக்கு ஏற்றது.
Efficiency உயர் செயல்திறன் மற்றும் தனித்தன்மை: ஆன்டிபாடி-மாற்றியமைக்கப்பட்ட டாக் பாலிமரேஸின் தனித்துவமான இடையகம் திறமையான பாலிமரேஸ் பெருக்கத்தை உறுதி செய்கிறது, இது சாதாரண டாக் பாலிமரேஸை விட குறிப்பிட்டது.

விண்ணப்பங்கள்

இந்த கிட் கோதுமை, சோளம், அரிசி, பருத்தி மற்றும் சோயாபீன் போன்ற முக்கிய GMO பயிர்களிலிருந்து உயர்தர மரபணு டிஎன்ஏவைப் பிரித்தெடுக்க முடியும், மேலும் GMO பயிர்களில் டிரான்ஸ்ஜெனிக் PCR கண்டறிதலைச் செய்ய முடியும்.

அனைத்து தயாரிப்புகளையும் ODM/OEM க்கு தனிப்பயனாக்கலாம். விவரங்களுக்கு,தயவுசெய்து தனிப்பயனாக்கப்பட்ட சேவையைக் கிளிக் செய்யவும் (ODM/OEM)

முந்தைய: FastKing ஒரு படி RT-qPCR கிட் (ஆய்வு)

அடுத்தது: TIANcombi DNA Lyse & Det PCR கிட்

மரபணு டிஎன்ஏ பிரித்தெடுத்தல்
மரபணு டிஎன்ஏ பிரித்தெடுத்தல் முறையே 100 மி.கி. அரிசி, சோளம், சோயாபீன், பருத்தி மற்றும் கோதுமை இலைகளில் செய்யப்பட்டது. சோதனை இரண்டு முறை மீண்டும் மீண்டும் செய்யப்பட்டது. மொத்த 100 μl எலுண்டுகளிலிருந்து 3 μl டிஎன்ஏ ஒரு பாதையில் ஏற்றப்பட்டது.
அகரோஸ் ஜெலின் செறிவு 2%ஆகும். எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் 6 வி/செமீ கீழ் 20 நிமிடங்கள் செய்யப்பட்டது.
D15000: TIANGEN D15000 DNA மார்க்கர்.

பிசிஆர் கண்டறிதல்
அரிசி, சோளம், சோயாபீன், பருத்தி மற்றும் கோதுமை ஆகியவற்றின் மரபணு டிஎன்ஏ முறையே பெருக்கப்பட்டது. சோதனை இரண்டு முறை மீண்டும் மீண்டும் செய்யப்பட்டது. மொத்த 20 μl எதிர்வினை அமைப்பிலிருந்து 6 μl ஒரு பாதையில் ஏற்றப்பட்டது.
அகரோஸ் ஜெலின் செறிவு 2%ஆகும். எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் 6 வி/செமீ கீழ் 20 நிமிடங்கள் செய்யப்பட்டது.
D15000: TIANGEN D15000 DNA மார்க்கர்.

கே: பெருக்க பட்டைகள் இல்லை

A-1 டெம்ப்ளேட்

டெம்ப்ளேட்டில் புரத அசுத்தங்கள் அல்லது தாக் தடுப்பான்கள் போன்றவை உள்ளன - டிஎன்ஏ டெம்ப்ளேட்டை சுத்திகரிக்கவும், புரத அசுத்தங்களை அகற்றவும் அல்லது டெம்ப்ளேட் டிஎன்ஏவை சுத்திகரிப்பு கருவிகளுடன் பிரித்தெடுக்கவும்.

Temp டெம்ப்ளேட்டின் அழித்தல் முழுமையடையவில்லை —— தகுந்த முறையில் டீனேட்டரேஷன் வெப்பநிலையை அதிகரிக்கவும் மற்றும் டீனேட்டரேஷன் நேரத்தை நீடிக்கவும்.

■ டெம்ப்ளேட் சீரழிவு —— டெம்ப்ளேட்டை மீண்டும் தயார் செய்யவும்.

ஏ -2 ப்ரைமர்

ப்ரைமர்களின் மோசமான தரம் —— ப்ரைமரை மீண்டும் ஒருங்கிணைக்கவும்.

Mer ப்ரைமர் சிதைவு —— அதிக செறிவு கொண்ட ப்ரைமர்களை சிறிய அளவில் பாதுகாக்க. பல உறைபனி மற்றும் கரைத்தல் அல்லது நீண்ட கால 4 ° C கிரையோபிரசர்வ் ஆகியவற்றைத் தவிர்க்கவும்.

Pri ப்ரைமர்களின் பொருத்தமற்ற வடிவமைப்பு (எ.கா. ப்ரைமர் நீளம் போதாது, ப்ரைமர்களுக்கு இடையில் டைமர் உருவாகிறது, முதலியன) -மறுவடிவமைப்பு ப்ரைமர்கள் (ப்ரைமர் டைமர் மற்றும் இரண்டாம் நிலை அமைப்பு உருவாவதைத் தவிர்க்கவும்)

A-3 Mg²⁺செறிவு

எம்ஜி²⁺ செறிவு மிகக் குறைவு —— சரியாக Mg அதிகரிக்கவும்²⁺செறிவு: Mg ஐ மேம்படுத்தவும்²⁺ உகந்த Mg ஐ தீர்மானிக்க 0.5 mM இடைவெளியுடன் 1 mM முதல் 3 mM வரை தொடர்ச்சியான எதிர்வினைகளால் செறிவு²⁺ ஒவ்வொரு டெம்ப்ளேட் மற்றும் ப்ரைமருக்கும் செறிவு.

A-4 அனீலிங் வெப்பநிலை

அதிக அனீலிங் வெப்பநிலை ப்ரைமர் மற்றும் டெம்ப்ளேட்டை பிணைப்பதை பாதிக்கிறது. அனீலிங் வெப்பநிலையைக் குறைத்து, 2 ° C சாய்வுடன் நிலையை மேம்படுத்தவும்.

A-5 நீட்டிப்பு நேரம்

Extension குறுகிய நீட்டிப்பு நேரம் —— நீட்டிப்பு நேரத்தை அதிகரிக்கவும்.

கே: தவறான நேர்மறை

நிகழ்வுகள்: எதிர்மறை மாதிரிகள் இலக்கு வரிசை பட்டைகளையும் காட்டுகின்றன.

A-1 PCR மாசுபாடு

Target இலக்கு வரிசை அல்லது பெருக்கப் பொருட்களின் குறுக்கு மாசுபாடு —- எதிர்மறை மாதிரியில் இலக்கு வரிசை கொண்ட மாதிரியை கவனமாக குழாய் செய்யவோ அல்லது மையவிலக்கு குழாயிலிருந்து வெளியேற்றவோ கூடாது. தற்போதுள்ள நியூக்ளிக் அமிலங்களை அகற்றுவதற்கான காரணிகள் அல்லது உபகரணங்கள் ஆட்டோகிளேவ் செய்யப்பட வேண்டும், மேலும் மாசுபாட்டின் இருப்பு எதிர்மறை கட்டுப்பாட்டு சோதனைகள் மூலம் தீர்மானிக்கப்பட வேண்டும்.

Ag உலை மாசுபடுதல் ——உலைகள் மற்றும் குறைந்த வெப்பநிலையில் சேமித்தல்.

ஏ -2 பிரைம்r

எம்ஜி²⁺ செறிவு மிகக் குறைவு —— சரியாக Mg அதிகரிக்கவும்²⁺ செறிவு: Mg ஐ மேம்படுத்தவும்²⁺ உகந்த Mg ஐ தீர்மானிக்க 0.5 mM இடைவெளியுடன் 1 mM முதல் 3 mM வரை தொடர்ச்சியான எதிர்வினைகளால் செறிவு²⁺ ஒவ்வொரு டெம்ப்ளேட் மற்றும் ப்ரைமருக்கும் செறிவு.

Pri தவறான ப்ரைமர் வடிவமைப்பு, மற்றும் இலக்கு வரிசை இலக்கு அல்லாத வரிசையுடன் ஒரே மாதிரியானது. —— மறு-வடிவமைப்பு ப்ரைமர்கள்.

கே: குறிப்பிட்ட அல்லாத பெருக்கம்

நிகழ்வுகள்: பிசிஆர் பெருக்கி பட்டைகள் பெரிய அல்லது சிறிய, அல்லது சில நேரங்களில் குறிப்பிட்ட பெருக்கி பட்டைகள் மற்றும் குறிப்பிட்ட அல்லாத பெருக்கி பட்டைகள் ஏற்படும் எதிர்பார்த்த அளவு முரண்படுகின்றன.

ஏ -1 ப்ரைமர்

Pri மோசமான ப்ரைமர் விவரக்குறிப்பு

—— மறு வடிவமைப்பு ப்ரைமர்.

Mer ப்ரைமர் செறிவு மிக அதிகமாக உள்ளது ——சீரற்ற வெப்பநிலையை முறையாக அதிகரிக்கவும் மற்றும் நீக்குதல் நேரத்தை அதிகரிக்கவும்.

A-2 Mg²⁺ செறிவு

எம்ஜி²⁺ செறிவு மிக அதிகமாக உள்ளது —— Mg2+ செறிவை சரியாகக் குறைக்கவும்: Mg ஐ மேம்படுத்தவும்²⁺ உகந்த Mg ஐ தீர்மானிக்க 0.5 mM இடைவெளியுடன் 1 mM முதல் 3 mM வரை தொடர்ச்சியான எதிர்வினைகளால் செறிவு²⁺ ஒவ்வொரு டெம்ப்ளேட் மற்றும் ப்ரைமருக்கும் செறிவு.

ஏ -3 தெர்மோஸ்டபிள் பாலிமரேஸ்

En அதிகப்படியான என்சைம் அளவு —— 0.5 U இன் இடைவெளியில் என்சைம் அளவைக் குறைக்கவும்.

A-4 அனீலிங் வெப்பநிலை

Ne அனீலிங் வெப்பநிலை மிகக் குறைவு —— பொருத்தமாக அனீலிங் வெப்பநிலையை அதிகரிக்கவும் அல்லது இரண்டு-நிலை அனீலிங் முறையைப் பின்பற்றவும்

A-5 PCR சுழற்சிகள்

P அதிகமான PCR சுழற்சிகள் —— PCR சுழற்சிகளின் எண்ணிக்கையைக் குறைக்கவும்.

கே: ஒட்டு அல்லது ஸ்மியர் பட்டைகள்

ஏ -1 ப்ரைமர்—— மோசமான விவரக்குறிப்பு —- ப்ரைமரை மீண்டும் வடிவமைக்கவும், ப்ரைமரின் நிலை மற்றும் நீளத்தை அதன் தனித்தன்மையை அதிகரிக்க மாற்றவும்; அல்லது உள்ளமை PCR செய்யவும்.

A-2 டெம்ப்ளேட் DNA

டெம்ப்ளேட் சுத்தமாக இல்லை — டெம்ப்ளேட்டை சுத்திகரிக்கவும் அல்லது டிஎன்ஏவை சுத்திகரிப்பு கருவிகளுடன் பிரித்தெடுக்கவும்.

A-3 Mg²⁺ செறிவு

--- எம்ஜி²⁺ செறிவு மிக அதிகம் —— Mg ஐ சரியாகக் குறைக்கவும்²⁺ செறிவு: Mg ஐ மேம்படுத்தவும்²⁺ உகந்த Mg ஐ தீர்மானிக்க 0.5 mM இடைவெளியுடன் 1 mM முதல் 3 mM வரை தொடர்ச்சியான எதிர்வினைகளால் செறிவு²⁺ ஒவ்வொரு டெம்ப்ளேட் மற்றும் ப்ரைமருக்கும் செறிவு.

A-4 dNTP

- டிஎன்டிபிகளின் செறிவு மிக அதிகமாக உள்ளது - டிஎன்டிபியின் செறிவை சரியான முறையில் குறைக்கவும்

A-5 அனீலிங் வெப்பநிலை

--— மிகக் குறைவான அனீலிங் வெப்பநிலை —— அனீலிங் வெப்பநிலையைப் பொருத்தமாக அதிகரிக்கவும்

ஏ -6 சுழற்சிகள்

——————————————————————————————————————————————————————————————————————

கே: 50 μl PCR எதிர்வினை அமைப்பில் எவ்வளவு டெம்ப்ளேட் டிஎன்ஏ சேர்க்க வேண்டும்?

கே: நீண்ட துண்டுகளை எவ்வாறு பெருக்குவது?

முதல் படி பொருத்தமான பாலிமரேஸைத் தேர்ந்தெடுப்பது. 3'-5 'எக்ஸான்யூக்லீஸ் செயல்பாடு இல்லாததால் வழக்கமான டாக் பாலிமரேஸ் சரிபார்ப்பு செய்ய முடியாது, மேலும் பொருந்தாதது துண்டுகளின் நீட்டிப்பு செயல்திறனை பெரிதும் குறைக்கும். எனவே, வழக்கமான Taq பாலிமரேஸ் 5 kb ஐ விட பெரிய இலக்கு துண்டுகளை திறம்பட பெருக்க முடியாது. நீட்டிப்பு செயல்திறனை மேம்படுத்துவதற்கும் நீண்ட துண்டு பெருக்கத்தின் தேவைகளைப் பூர்த்தி செய்வதற்கும் சிறப்பு மாற்றம் அல்லது பிற உயர் நம்பகத்தன்மை கொண்ட பாலிமரேஸ் கொண்ட டாக் பாலிமரேஸ் தேர்ந்தெடுக்கப்பட வேண்டும். கூடுதலாக, நீண்ட துண்டுகளின் பெருக்கத்திற்கு ப்ரைமர் டிசைன், டினாடரேஷன் நேரம், எக்ஸ்டென்ஷன் டைம், பஃபர் பிஹெச் போன்றவற்றை சரிசெய்தல் தேவைப்படுகிறது. பொதுவாக, 18-24 பிபி கொண்ட ப்ரைமர்கள் சிறந்த மகசூலுக்கு வழிவகுக்கும். டெம்ப்ளேட் சேதத்தைத் தடுப்பதற்காக, 94 ° C இல் உள்ள நீக்கம் நேரம் 30 வினாடிக்கு அல்லது ஒரு சுழற்சிக்கு குறைவாகக் குறைக்கப்பட வேண்டும், மேலும் பெருக்கத்திற்கு முன் வெப்பநிலையை 94 ° C ஆக உயர்த்தும் நேரம் 1 நிமிடத்திற்கும் குறைவாக இருக்க வேண்டும். மேலும், நீட்டிப்பு வெப்பநிலையை சுமார் 68 ° C ஆக அமைப்பது மற்றும் 1 kb/min விகிதத்திற்கு ஏற்ப நீட்டிப்பு நேரத்தை வடிவமைப்பது நீண்ட துண்டுகளின் பயனுள்ள பெருக்கத்தை உறுதி செய்யும்.

கே: பிசிஆரின் பெருக்க விசுவாசத்தை எவ்வாறு மேம்படுத்துவது?

அதிக நம்பகத்தன்மை கொண்ட பல்வேறு டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ்களைப் பயன்படுத்துவதன் மூலம் பிசிஆர் பெருக்கத்தின் பிழை வீதத்தைக் குறைக்க முடியும். இதுவரை கண்டுபிடிக்கப்பட்ட அனைத்து டாக் டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ்களிலும், பிஃபு என்சைம் மிகக் குறைந்த பிழை வீதத்தையும் அதிக நம்பகத்தன்மையையும் கொண்டுள்ளது (இணைக்கப்பட்ட அட்டவணையைப் பார்க்கவும்). என்சைம் தேர்வுக்கு கூடுதலாக, ஆராய்ச்சியாளர்கள் பிசிஆர் பிறழ்வு விகிதத்தை மேலும் குறைக்கலாம், எதிர்வினை நிலைமைகளை மேம்படுத்துதல், இடையக கலவையை மேம்படுத்துதல், தெர்மோஸ்டபிள் பாலிமரேஸின் செறிவு மற்றும் பிசிஆர் சுழற்சி எண்ணை மேம்படுத்துதல்.

உங்கள் செய்தியை இங்கே எழுதி எங்களுக்கு அனுப்புங்கள்

தயாரிப்புகளின் வகைகள்

ஏன் எங்களை தேர்வு செய்தாய்

நிறுவப்பட்டதிலிருந்து, எங்கள் தொழிற்சாலை கொள்கையை கடைபிடித்து முதல் உலகத்தரம் வாய்ந்த தயாரிப்புகளை உருவாக்கி வருகிறது
முதலில் தரம். எங்கள் தயாரிப்புகள் தொழில்துறையில் சிறந்த நற்பெயரையும் புதிய மற்றும் பழைய வாடிக்கையாளர்களிடையே மதிப்புமிக்க நம்பிக்கையையும் பெற்றுள்ளன.

விசாரணை