TGuide செல்கள்/திசு/ஆலை RNA கிட்

A-1 செல் சிதைவு அல்லது ஓரினச்சேர்க்கை போதுமானதாக இல்லை

---- மாதிரி உபயோகத்தைக் குறைக்கவும், லைசிஸ் பஃப்பரின் அளவை அதிகரிக்கவும், ஓரினச்சேர்க்கை மற்றும் லிசிஸ் நேரத்தை அதிகரிக்கவும்.

A-2 மாதிரி தொகை மிகப் பெரியது

---- பயன்படுத்தப்படும் மாதிரியின் அளவைக் குறைக்கவும் அல்லது லைசிஸ் இடையகத்தின் அளவை அதிகரிக்கவும்.

A-1 போதுமான செல் சிதைவு அல்லது ஓரினச்சேர்க்கை

---- மாதிரி உபயோகத்தைக் குறைக்கவும், லைசிஸ் பஃப்பரின் அளவை அதிகரிக்கவும், ஓரினச்சேர்க்கை மற்றும் லிசிஸ் நேரத்தை அதிகரிக்கவும்.

A-2 மாதிரி தொகை மிகப் பெரியது

---- அதிகபட்ச செயலாக்கத் திறனைப் பார்க்கவும்.

A-3 RNA நெடுவரிசையில் இருந்து முழுமையாக நீக்கப்படவில்லை

---- RNase- இல்லாத தண்ணீரைச் சேர்த்த பிறகு, மையவிலக்குக்கு முன் சில நிமிடங்கள் விட்டு விடுங்கள்.

எ -4 இல் எத்தனால்

---- கழுவிய பின், மீண்டும் மையவிலக்கு மற்றும் முடிந்தவரை சலவை தாங்கியை அகற்றவும்.

A-5 செல் கலாச்சார ஊடகம் முழுமையாக நீக்கப்படவில்லை

---- கலங்களை சேகரிக்கும் போது, ​​தயவுசெய்து முடிந்தவரை கலாச்சார ஊடகத்தை அகற்றுவதை உறுதி செய்யவும்.

A-6 RNAstore இல் சேமிக்கப்பட்ட செல்கள் திறம்பட மையப்படுத்தப்படவில்லை

---- RNAstore அடர்த்தி சராசரி செல் கலாச்சார ஊடகத்தை விட அதிகமாக உள்ளது; எனவே மையவிலக்கு விசையை அதிகரிக்க வேண்டும். இது 3000x கிராம் மையவிலக்கு பரிந்துரைக்கப்படுகிறது.

A-7 குறைந்த RNA உள்ளடக்கம் மற்றும் மாதிரியில் மிகுதியாக

---- மாதிரியால் குறைந்த மகசூல் உண்டா என்பதைத் தீர்மானிக்க நேர்மறையான மாதிரியைப் பயன்படுத்தவும்.

A-1 பொருள் புதியதாக இல்லை

---- பிரித்தெடுத்தல் விளைவை உறுதி செய்ய புதிய திசுக்களை உடனடியாக திரவ நைட்ரஜனில் சேமித்து வைக்க வேண்டும் அல்லது உடனடியாக RNAstore உலைக்குள் வைக்க வேண்டும்.

A-2 மாதிரி தொகை மிகப் பெரியது

---- மாதிரி அளவை குறைக்கவும்.

A-3 RNase மாசுபாடுn

---- கிட்டில் வழங்கப்படும் இடையகத்தில் RNase இல்லை என்றாலும், பிரித்தெடுக்கும் செயல்பாட்டின் போது RNase ஐ மாசுபடுத்துவது எளிது மற்றும் கவனமாக கையாள வேண்டும்.

ஏ -4 எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் மாசு

---- எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் இடையகத்தை மாற்றவும் மற்றும் நுகர்பொருட்கள் மற்றும் ஏற்றும் இடையகங்கள் RNase மாசுபடாமல் இருப்பதை உறுதி செய்யவும்.

A-5 எலக்ட்ரோபோரேசிஸுக்கு அதிக ஏற்றுதல்

---- மாதிரி ஏற்றும் அளவைக் குறைக்கவும், ஒவ்வொரு கிணற்றையும் ஏற்றுவது 2 μg ஐ தாண்டக்கூடாது.

A-1 மாதிரி தொகை மிகப் பெரியது

---- மாதிரி அளவை குறைக்கவும்.

A-2 சில மாதிரிகள் அதிக DNA உள்ளடக்கத்தைக் கொண்டுள்ளன மற்றும் DNase உடன் சிகிச்சையளிக்க முடியும்.

---- பெறப்பட்ட ஆர்என்ஏ கரைசலுக்கு ஆர்என்ஏஎஸ்-இலவச டிஎன்ஏஎஸ் சிகிச்சை செய்யவும், சிகிச்சையின் பின்னர் அடுத்தடுத்த பரிசோதனைகளுக்கு ஆர்என்ஏவை நேரடியாகப் பயன்படுத்தலாம் அல்லது ஆர்என்ஏ சுத்திகரிப்பு கருவிகளால் மேலும் சுத்திகரிக்கலாம்.

கண்ணாடிகளுக்கு, 150 ° C வெப்பநிலையில் 4 மணிநேரத்திற்கு சுடப்படும். பிளாஸ்டிக் கொள்கலன்களுக்கு, 0.5 M NaOH இல் 10 நிமிடம் மூழ்கி, பின்னர் RNase இல்லாத நீரில் நன்கு கழுவி, பின்னர் RNase ஐ முழுவதுமாக அகற்ற கருத்தடை செய்யவும். சோதனையில் பயன்படுத்தப்படும் உலைகள் அல்லது தீர்வுகள், குறிப்பாக நீர், ஆர்என்ஏஎஸ் இல்லாததாக இருக்க வேண்டும். அனைத்து மறுசீரமைப்பு தயாரிப்புகளுக்கும் RNase இல்லாத தண்ணீரைப் பயன்படுத்தவும் (சுத்தமான கண்ணாடி பாட்டில் தண்ணீரைச் சேர்க்கவும், DEPC யை 0.1% (V/V) இறுதி செறிவில் சேர்க்கவும், ஒரே இரவில் குலுக்கி ஆட்டோகிளேவ் செய்யவும்).