TIANcombi DNA Lyse & Det PCR கிட்

பிசிஆர் கண்டறிதலுக்காக பல்வேறு பொருட்களிலிருந்து டிஎன்ஏவை விரைவாக சுத்திகரித்தல்.

TIANcombi DNA Lyse & Det PCR கிட் ஒரு தனித்துவமான பேக்கேஜிங் வடிவமைப்பை ஏற்றுக்கொள்கிறது, இது விரைவான மரபணு டிஎன்ஏ தயாரிப்பு மற்றும் பிசிஆர் பெருக்கத்திற்கான அனைத்து காரணிகளையும் உள்ளடக்கியது. பல்வேறு மாதிரிகள் (தாவர திசுக்கள், விதைகள், விலங்கு திசுக்கள், இரத்தம், ஈஸ்ட் மற்றும் பாக்டீரியா) மற்றும் அடுத்தடுத்த பிசிஆர் பெருக்கம் மற்றும் கண்டறிதல் ஆகியவற்றிலிருந்து ஒரு படி மரபணு டிஎன்ஏ சுத்திகரிப்புக்கும் இது பொருந்தும். புரதம், ஆர்என்ஏ மற்றும் பிற இரண்டாம் நிலை வளர்சிதை மாற்றங்களை நீக்குதல், கரிம கரைப்பான் பிரித்தெடுத்தல் மற்றும் எத்தனால் மழை படிகள் முழு சுத்திகரிப்பு செயல்முறையிலும் தேவையில்லை, இது செயல்பாட்டை எளிதாகவும் வேகமாகவும் ஆக்குகிறது. தயாரிப்பு தரம் நிலையானது மற்றும் நம்பகமானது.

இந்த கிட் வழங்கிய 2 × டெட் பிசிஆர் மாஸ்டர்மிக்ஸ் மிகவும் இணக்கமான பிசிஆர் ரியாகண்ட் ஆகும், இது புரதங்கள் போன்ற அசுத்தங்களை அகற்ற வேண்டிய அவசியமின்றி டிஎன்ஏவை திறம்பட மற்றும் குறிப்பாக அதிகரிக்க முடியும். இந்த வினைப்பொருளில் Taq DNA பாலிமரேஸ், dNTP கள், MgCl உள்ளது₂, தாங்கல், அத்துடன் பிசிஆர் எதிர்வினைக்கான மேம்படுத்தி, உகப்பாக்கி மற்றும் நிலைப்படுத்தி. வினையின் பயன்பாடு பிசிஆர் எதிர்வினை வேகமான, எளிமையான, உணர்திறன், குறிப்பிட்ட மற்றும் நிலையானதாக அமைகிறது. எனவே, இந்த கருவி குறிப்பாக உயர்-செயல்திறன் திரையிடலுக்கு ஏற்றது.

பூனை இல்லை	பேக்கிங் அளவு
4992527	20 µl × 50 rxn
4992528	20 µl × 200 rxn

எங்களுக்கு மின்னஞ்சல் அனுப்பவும்

தயாரிப்பு விவரம்

சோதனை உதாரணம்

அடிக்கடி கேட்கப்படும் கேள்விகள்

தயாரிப்பு குறிச்சொற்கள்

அம்சங்கள்

And எளிய மற்றும் வேகமான: திரவ நைட்ரஜன் அரைக்கும் தேவை இல்லாமல் வெவ்வேறு திசுக்களில் இருந்து டிஎன்ஏவை 5 நிமிடங்களில் பிரித்தெடுக்க முடியும்.
பரந்த பயன்பாடுகள்: தாவர இலைகள், விதைகள், விலங்கு திசுக்கள், இரத்த மாதிரிகள் (புதிய இரத்தம், ஆன்டிகோகுலேஷன், இரத்தக் கட்டிகள், உலர்ந்த இரத்தப் புள்ளிகள் போன்றவை), ஈஸ்ட் மற்றும் பாக்டீரியாக்களுக்குப் பொருந்தும்.
Comp வலுவான பொருந்தக்கூடிய தன்மை: பல்வேறு மாதிரி ஆதாரங்களில் இருந்து பிரித்தெடுக்கப்பட்ட டிஎன்ஏவின் பெருக்கத்திற்கு பிசிஆர் உலை பொருத்தமானது.

விண்ணப்பங்கள்

Ene மரபணு கண்டறிதல்: பெரிய அளவிலான மரபணு கண்டறிதலுக்கான சிறந்த தேர்வு.

முக்கியமான குறிப்புகள்

பருத்தி இலைகள் போன்ற பினால்கள் அதிக அளவில் உள்ள மாதிரிகளுக்கு, மாதிரி உள்ளீட்டு அளவு கண்டிப்பாக 0.4 மி.கி.க்கு குறைவாக இருக்க வேண்டும், இல்லையெனில் பிசிஆர் எதிர்வினை பாதிக்கப்படும்.

அனைத்து தயாரிப்புகளையும் ODM/OEM க்கு தனிப்பயனாக்கலாம். விவரங்களுக்கு,தயவுசெய்து தனிப்பயனாக்கப்பட்ட சேவையைக் கிளிக் செய்யவும் (ODM/OEM)

முந்தைய: GMO பயிர் பிரித்தெடுத்தல் & பெருக்கம் கிட்

அடுத்தது: இரத்த நேரடி பிசிஆர் கிட்

	சோளம், கோதுமை, அரிசி, சோயாபீன் மற்றும் பருத்தி ஆகியவற்றின் முறையே 5 மி.கி இலைகள் மற்றும் விதைகளிலிருந்து டிஎன்ஏ பிரித்தெடுக்கப்பட்டது. டிஎன்ஏ குறிப்பிட்ட ப்ரைமர்களைப் பயன்படுத்தி பிசிஆரால் பெருக்கப்பட்டது. மொத்த 20 μl எலுண்டுகளிலிருந்து 6 μl டிஎன்ஏ ஒரு பாதையில் ஏற்றப்பட்டது. 1: நேர்மறை கட்டுப்பாட்டு மரபணு; 2: மாதிரிகளை விடுங்கள்; 3: விதை மாதிரிகள்; 4: என்டிசி; 5: D2000 ப்ரைமர்கள்
	எம்: TIANGEN மார்க்கர் D2000; 1: நேர்மறை கட்டுப்பாடு; 2-7: வடிகட்டி தாளில் உலர்ந்த இரத்தப் புள்ளிகளின் எண்ணிக்கை முறையே 1-6; 8: எதிர்மறை கட்டுப்பாடு. வடிகட்டி காகிதத்திலிருந்து உலர்ந்த இரத்தப் புள்ளிகளை பிரித்தெடுக்கும் சோதனைக்கான பொருளாக எடுக்க 3 மிமீ பஞ்சர் பயன்படுத்தப்பட்டது. மொத்த 20 μl எலுண்டுகளிலிருந்து 6 μl டிஎன்ஏ ஒரு பாதையில் ஏற்றப்பட்டது.
	எம்: TIANGEN மார்க்கர் D2000; 1: நேர்மறை கட்டுப்பாடு (மரபணு டிஎன்ஏ டெம்ப்ளேட்டாக பயன்படுத்தப்பட்டது); 2-7: சேர்க்கப்படும் இரத்தத்தின் அளவு முறையே 10 μl, 20 μl, 30 μl, 40 μl, 50 μl மற்றும் 60 μl; 8-13: சேர்க்கப்பட்ட இரத்தத்தின் அளவு முறையே 10 μl, 20 μl, 30 μl, 40 μl, 50 μl மற்றும் 60 μl; 14: என்டிசி. மொத்த 20 μl எலுண்டுகளிலிருந்து 6 μl டிஎன்ஏ அகரோஸ் ஜெலில் ஏற்றப்பட்டது.

கே: பெருக்க பட்டைகள் இல்லை

A-1 டெம்ப்ளேட்

டெம்ப்ளேட்டில் புரத அசுத்தங்கள் அல்லது தாக் தடுப்பான்கள் போன்றவை உள்ளன - டிஎன்ஏ டெம்ப்ளேட்டை சுத்திகரிக்கவும், புரத அசுத்தங்களை அகற்றவும் அல்லது டெம்ப்ளேட் டிஎன்ஏவை சுத்திகரிப்பு கருவிகளுடன் பிரித்தெடுக்கவும்.

Temp டெம்ப்ளேட்டின் அழித்தல் முழுமையடையவில்லை —— தகுந்த முறையில் டீனேட்டரேஷன் வெப்பநிலையை அதிகரிக்கவும் மற்றும் டீனேட்டரேஷன் நேரத்தை நீடிக்கவும்.

■ டெம்ப்ளேட் சீரழிவு —— டெம்ப்ளேட்டை மீண்டும் தயார் செய்யவும்.

ஏ -2 ப்ரைமர்

ப்ரைமர்களின் மோசமான தரம் —— ப்ரைமரை மீண்டும் ஒருங்கிணைக்கவும்.

Mer ப்ரைமர் சிதைவு —— அதிக செறிவு கொண்ட ப்ரைமர்களை சிறிய அளவில் பாதுகாக்க. பல உறைபனி மற்றும் கரைத்தல் அல்லது நீண்ட கால 4 ° C கிரையோபிரசர்வ் ஆகியவற்றைத் தவிர்க்கவும்.

Pri ப்ரைமர்களின் பொருத்தமற்ற வடிவமைப்பு (எ.கா. ப்ரைமர் நீளம் போதாது, ப்ரைமர்களுக்கு இடையில் டைமர் உருவாகிறது, முதலியன) -மறுவடிவமைப்பு ப்ரைமர்கள் (ப்ரைமர் டைமர் மற்றும் இரண்டாம் நிலை அமைப்பு உருவாவதைத் தவிர்க்கவும்)

A-3 Mg²⁺செறிவு

எம்ஜி²⁺ செறிவு மிகக் குறைவு —— சரியாக Mg அதிகரிக்கவும்²⁺செறிவு: Mg ஐ மேம்படுத்தவும்²⁺ உகந்த Mg ஐ தீர்மானிக்க 0.5 mM இடைவெளியுடன் 1 mM முதல் 3 mM வரை தொடர்ச்சியான எதிர்வினைகளால் செறிவு²⁺ ஒவ்வொரு டெம்ப்ளேட் மற்றும் ப்ரைமருக்கும் செறிவு.

A-4 அனீலிங் வெப்பநிலை

அதிக அனீலிங் வெப்பநிலை ப்ரைமர் மற்றும் டெம்ப்ளேட்டை பிணைப்பதை பாதிக்கிறது. அனீலிங் வெப்பநிலையைக் குறைத்து, 2 ° C சாய்வுடன் நிலையை மேம்படுத்தவும்.

A-5 நீட்டிப்பு நேரம்

Extension குறுகிய நீட்டிப்பு நேரம் —— நீட்டிப்பு நேரத்தை அதிகரிக்கவும்.

கே: தவறான நேர்மறை

நிகழ்வுகள்: எதிர்மறை மாதிரிகள் இலக்கு வரிசை பட்டைகளையும் காட்டுகின்றன.

A-1 PCR மாசுபாடு

Target இலக்கு வரிசை அல்லது பெருக்கப் பொருட்களின் குறுக்கு மாசுபாடு —- எதிர்மறை மாதிரியில் இலக்கு வரிசை கொண்ட மாதிரியை கவனமாக குழாய் செய்யவோ அல்லது மையவிலக்கு குழாயிலிருந்து வெளியேற்றவோ கூடாது. தற்போதுள்ள நியூக்ளிக் அமிலங்களை அகற்றுவதற்கான காரணிகள் அல்லது உபகரணங்கள் ஆட்டோகிளேவ் செய்யப்பட வேண்டும், மேலும் மாசுபாட்டின் இருப்பு எதிர்மறை கட்டுப்பாட்டு சோதனைகள் மூலம் தீர்மானிக்கப்பட வேண்டும்.

Ag உலை மாசுபடுதல் ——உலைகள் மற்றும் குறைந்த வெப்பநிலையில் சேமித்தல்.

ஏ -2 பிரைம்r

எம்ஜி²⁺ செறிவு மிகக் குறைவு —— சரியாக Mg அதிகரிக்கவும்²⁺ செறிவு: Mg ஐ மேம்படுத்தவும்²⁺ உகந்த Mg ஐ தீர்மானிக்க 0.5 mM இடைவெளியுடன் 1 mM முதல் 3 mM வரை தொடர்ச்சியான எதிர்வினைகளால் செறிவு²⁺ ஒவ்வொரு டெம்ப்ளேட் மற்றும் ப்ரைமருக்கும் செறிவு.

Pri தவறான ப்ரைமர் வடிவமைப்பு, மற்றும் இலக்கு வரிசை இலக்கு அல்லாத வரிசையுடன் ஒரே மாதிரியானது. —— மறு-வடிவமைப்பு ப்ரைமர்கள்.

கே: குறிப்பிட்ட அல்லாத பெருக்கம்

நிகழ்வுகள்: பிசிஆர் பெருக்கி பட்டைகள் பெரிய அல்லது சிறிய, அல்லது சில நேரங்களில் குறிப்பிட்ட பெருக்கி பட்டைகள் மற்றும் குறிப்பிட்ட அல்லாத பெருக்கி பட்டைகள் ஏற்படும் எதிர்பார்த்த அளவு முரண்படுகின்றன.

ஏ -1 ப்ரைமர்

Pri மோசமான ப்ரைமர் விவரக்குறிப்பு

—— மறு வடிவமைப்பு ப்ரைமர்.

Mer ப்ரைமர் செறிவு மிக அதிகமாக உள்ளது ——சீரற்ற வெப்பநிலையை முறையாக அதிகரிக்கவும் மற்றும் நீக்குதல் நேரத்தை அதிகரிக்கவும்.

A-2 Mg²⁺ செறிவு

எம்ஜி²⁺ செறிவு மிக அதிகமாக உள்ளது —— Mg2+ செறிவை சரியாகக் குறைக்கவும்: Mg ஐ மேம்படுத்தவும்²⁺ உகந்த Mg ஐ தீர்மானிக்க 0.5 mM இடைவெளியுடன் 1 mM முதல் 3 mM வரை தொடர்ச்சியான எதிர்வினைகளால் செறிவு²⁺ ஒவ்வொரு டெம்ப்ளேட் மற்றும் ப்ரைமருக்கும் செறிவு.

ஏ -3 தெர்மோஸ்டபிள் பாலிமரேஸ்

En அதிகப்படியான என்சைம் அளவு —— 0.5 U இன் இடைவெளியில் என்சைம் அளவைக் குறைக்கவும்.

A-4 அனீலிங் வெப்பநிலை

Ne அனீலிங் வெப்பநிலை மிகக் குறைவு —— பொருத்தமாக அனீலிங் வெப்பநிலையை அதிகரிக்கவும் அல்லது இரண்டு-நிலை அனீலிங் முறையைப் பின்பற்றவும்

A-5 PCR சுழற்சிகள்

P அதிகமான PCR சுழற்சிகள் —— PCR சுழற்சிகளின் எண்ணிக்கையைக் குறைக்கவும்.

கே: ஒட்டு அல்லது ஸ்மியர் பட்டைகள்

ஏ -1 ப்ரைமர்—— மோசமான விவரக்குறிப்பு —- ப்ரைமரை மீண்டும் வடிவமைக்கவும், ப்ரைமரின் நிலை மற்றும் நீளத்தை அதன் தனித்தன்மையை அதிகரிக்க மாற்றவும்; அல்லது உள்ளமை PCR செய்யவும்.

A-2 டெம்ப்ளேட் DNA

டெம்ப்ளேட் சுத்தமாக இல்லை — டெம்ப்ளேட்டை சுத்திகரிக்கவும் அல்லது டிஎன்ஏவை சுத்திகரிப்பு கருவிகளுடன் பிரித்தெடுக்கவும்.

A-3 Mg²⁺ செறிவு

--- எம்ஜி²⁺ செறிவு மிக அதிகம் —— Mg ஐ சரியாகக் குறைக்கவும்²⁺ செறிவு: Mg ஐ மேம்படுத்தவும்²⁺ உகந்த Mg ஐ தீர்மானிக்க 0.5 mM இடைவெளியுடன் 1 mM முதல் 3 mM வரை தொடர்ச்சியான எதிர்வினைகளால் செறிவு²⁺ ஒவ்வொரு டெம்ப்ளேட் மற்றும் ப்ரைமருக்கும் செறிவு.

A-4 dNTP

- டிஎன்டிபிகளின் செறிவு மிக அதிகமாக உள்ளது - டிஎன்டிபியின் செறிவை சரியான முறையில் குறைக்கவும்

A-5 அனீலிங் வெப்பநிலை

--— மிகக் குறைவான அனீலிங் வெப்பநிலை —— அனீலிங் வெப்பநிலையைப் பொருத்தமாக அதிகரிக்கவும்

ஏ -6 சுழற்சிகள்

——————————————————————————————————————————————————————————————————————

கே: 50 μl PCR எதிர்வினை அமைப்பில் எவ்வளவு டெம்ப்ளேட் டிஎன்ஏ சேர்க்க வேண்டும்?

கே: நீண்ட துண்டுகளை எவ்வாறு பெருக்குவது?

முதல் படி பொருத்தமான பாலிமரேஸைத் தேர்ந்தெடுப்பது. 3'-5 'எக்ஸான்யூக்லீஸ் செயல்பாடு இல்லாததால் வழக்கமான டாக் பாலிமரேஸ் சரிபார்ப்பு செய்ய முடியாது, மேலும் பொருந்தாதது துண்டுகளின் நீட்டிப்பு செயல்திறனை பெரிதும் குறைக்கும். எனவே, வழக்கமான Taq பாலிமரேஸ் 5 kb ஐ விட பெரிய இலக்கு துண்டுகளை திறம்பட பெருக்க முடியாது. நீட்டிப்பு செயல்திறனை மேம்படுத்துவதற்கும் நீண்ட துண்டு பெருக்கத்தின் தேவைகளைப் பூர்த்தி செய்வதற்கும் சிறப்பு மாற்றம் அல்லது பிற உயர் நம்பகத்தன்மை கொண்ட பாலிமரேஸ் கொண்ட டாக் பாலிமரேஸ் தேர்ந்தெடுக்கப்பட வேண்டும். கூடுதலாக, நீண்ட துண்டுகளின் பெருக்கத்திற்கு ப்ரைமர் டிசைன், டினாடரேஷன் நேரம், எக்ஸ்டென்ஷன் டைம், பஃபர் பிஹெச் போன்றவற்றை சரிசெய்தல் தேவைப்படுகிறது. பொதுவாக, 18-24 பிபி கொண்ட ப்ரைமர்கள் சிறந்த மகசூலுக்கு வழிவகுக்கும். டெம்ப்ளேட் சேதத்தைத் தடுப்பதற்காக, 94 ° C இல் உள்ள நீக்கம் நேரம் 30 வினாடிக்கு அல்லது ஒரு சுழற்சிக்கு குறைவாகக் குறைக்கப்பட வேண்டும், மேலும் பெருக்கத்திற்கு முன் வெப்பநிலையை 94 ° C ஆக உயர்த்தும் நேரம் 1 நிமிடத்திற்கும் குறைவாக இருக்க வேண்டும். மேலும், நீட்டிப்பு வெப்பநிலையை சுமார் 68 ° C ஆக அமைப்பது மற்றும் 1 kb/min விகிதத்திற்கு ஏற்ப நீட்டிப்பு நேரத்தை வடிவமைப்பது நீண்ட துண்டுகளின் பயனுள்ள பெருக்கத்தை உறுதி செய்யும்.

கே: பிசிஆரின் பெருக்க விசுவாசத்தை எவ்வாறு மேம்படுத்துவது?

அதிக நம்பகத்தன்மை கொண்ட பல்வேறு டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ்களைப் பயன்படுத்துவதன் மூலம் பிசிஆர் பெருக்கத்தின் பிழை வீதத்தைக் குறைக்க முடியும். இதுவரை கண்டுபிடிக்கப்பட்ட அனைத்து டாக் டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ்களிலும், பிஃபு என்சைம் மிகக் குறைந்த பிழை வீதத்தையும் அதிக நம்பகத்தன்மையையும் கொண்டுள்ளது (இணைக்கப்பட்ட அட்டவணையைப் பார்க்கவும்). என்சைம் தேர்வுக்கு கூடுதலாக, ஆராய்ச்சியாளர்கள் பிசிஆர் பிறழ்வு விகிதத்தை மேலும் குறைக்கலாம், எதிர்வினை நிலைமைகளை மேம்படுத்துதல், இடையக கலவையை மேம்படுத்துதல், தெர்மோஸ்டபிள் பாலிமரேஸின் செறிவு மற்றும் பிசிஆர் சுழற்சி எண்ணை மேம்படுத்துதல்.

உங்கள் செய்தியை இங்கே எழுதி எங்களுக்கு அனுப்புங்கள்

தயாரிப்புகளின் வகைகள்

ஏன் எங்களை தேர்வு செய்தாய்

நிறுவப்பட்டதிலிருந்து, எங்கள் தொழிற்சாலை கொள்கையை கடைபிடித்து முதல் உலகத்தரம் வாய்ந்த தயாரிப்புகளை உருவாக்கி வருகிறது
முதலில் தரம். எங்கள் தயாரிப்புகள் தொழில்துறையில் சிறந்த நற்பெயரையும் புதிய மற்றும் பழைய வாடிக்கையாளர்களிடையே மதிப்புமிக்க நம்பிக்கையையும் பெற்றுள்ளன.

விசாரணை